Identification et étude fonctionnelle d’une mutation activatrice de la sous unité catalytique Cß de la PKA (PRKACB) dans un adénome corticosurrénalien sécrétant des glucocorticoïdes
S. Espiard*a (Dr), M. Knapeb (Dr), K. Bathonc (Mme), D. Abidb (M.), D. Calebiroc (Dr), S. Faillota (M.), G. Assiéa (Pr), L. Drougata (Dr), F. Herbergd (Dr), C. Stratakise (Dr), J. Bertherata (Pr)
a Institut Cochin, Paris, FRANCE ; b Département de biochimie, Kassel, ALLEMAGNE ; c Institute of Pharmacology and Toxicology and Bio-Imaging Center/Rudolf Virchow Center, Würzburg, ALLEMAGNE ; d Department of Biochemistry, Kassel university, Kassel, ALLEMAGNE ; e Program on Developmental Endocrinology and Genetics, Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development, Bethesda, ÉTATS-UNIS
* stephanie.espiard@live.fr
Introduction: Les mutations somatiques de PRKACA représentent environ 40% des adénomes surrénaliens cortisoliques (ASC). Dans un travail préliminaire de séquençage de l’exome de 8 ASC, nous avions identifié une mutation de PRKACB (p.S54L). L’objectif était de montrer que cette mutation était pathogène.
Matériels et méthodes : Un séquençage direct de PRKACB a été réalisé sur une cohorte de 21 autres adénomes. L’interaction du mutant Cb-S54L et de prkar1a a été étudiée par Bioluminescence Resonance Energy Transfert. L’impact de l’invalidation de la mutation sur l’activité PKA a été étudié par différentes approches (phosphorylation des substrats de la PKA, système rapporteur CRE-luciférase, substrat synthétique de la PKA).
Résultats : Aucune autre mutation n’a été trouvée. La mutation somatique S54L a été caractérisée dans un ASC chez une femme opérée à l’âge de 41 ans d’un adénome de 28mm responsable d’un syndrome de Cushing sévère. In vitro, la mutation conduit à une diminution de l’interaction avec prkar1a en base et après stimulation par forskoline. La dissociation de Cb-S54L de prkar1a est plus rapide après stimulation par l’AMPc, et à des concentrations inférieures d'AMPc, que pour Cb sauvage (Cb-WT). Cb-S54L est moins stable que Cb-WT, mais un niveau d’expression comparable est obtenu en augmentant le ratio Cb-S54L/prkar1a. En comparaison de Cb-WT, l’activité PKA de Cb-S54L est plus importante en base mais plus faible après stimulation par forskoline.
Conclusion : Cette observation démontre qu’à coté des fréquentes mutations de PRKACA, des mutations plus rares de PRKACB peuvent aussi entrainer une altération de l’activité PKA dans les ASC.
L’auteur n’a pas transmis de déclaration de conflit d’intérêt.